Hiljuti avaldati ajakirjas Science Translational Medicine Chunhong Ma, Chunyang Li ja Xinyin Liu Shandongi ülikooli Qilu meditsiinikolledži uusimad uurimistulemused.
Pärast enam kui 200 000 ühendi sõelumist tuvastas uurimisrühm edukalt väikese molekuliga ühendi ML-T7, mille sihtmärgiks on TIM-3. In vivo ja ex vivo katsete tulemused näitasid, et ML-T7 suutis tugevdada CD8-positiivsete T-rakkude ja CAR-T-rakkude kasvajavastast toimet ning et ravi üksi inhibeeris otseselt kasvaja progresseerumist hiirtel ja neil oli sünergistlik toime PD-1 inhibiitoritega.
TIM-3 on membraanivalk, mille IgV struktuurses domeenis on ainulaadne struktuur, mida tuntakse kui FG-CC' lõhet, mis on väga konserveerunud ligandi fosfatidüülseriini (PtdSer) ja kartsinoembrüonaalse antigeeniga seotud raku adhesioonimolekuli sidumissait. 1 (CEACAM1).
TIM-3 on membraanivalk, mille IgV struktuurses domeenis on ainulaadne struktuur, mida tuntakse kui FG-CC' lõhet, mis on väga konserveerunud ligandi fosfatidüülseriini (PtdSer) ja kartsinoembrüonaalse antigeeniga seotud raku adhesioonimolekuli sidumissait. 1 (CEACAM1).
Selles uuringus tuvastas meeskond ML-T7 204 380 väikese molekuliga ühendist Specs andmebaasis virtuaalse sõelumise kaudu koos funktsionaalse sõelumisstrateegiaga.
Kasutades selliseid tehnikaid nagu pinnaplasmonresonants (SRP) ning molekulaardünaamika ja kristallstruktuuri analüüse, kinnitas töörühm, et ML-T7 võib sihtida spetsiifiliselt TIM-3 FG-CC lõhet ja sellel on suurem afiinsus TIM{{ suhtes. 4}} kui PtdSer ja CEACAM1. ML-T7 stabiliseerib oma seondumist TIM-3-ga läbi FG-CC' lõhe, häirides TIM-3 seondumist PtdSer-iga, CEACAM1 seondumist ja interaktsiooni.
ML-T7 sõelumine ja iseloomustamine
In vitro katsete ja hiiremudeli katsete tulemused näitasid, et TIM-3 sihtimisega suutis ML-T7 soodustada CD8-positiivsete tsütotoksiliste T-rakkude ellujäämist, vohamist ja kasvajavastast toimet ning takistada nende funktsionaalset teket. ammendumine. ML-T7 ravi tulemuseks oli IL-2/STAT5 signaaliraja ülesreguleerimine, efektorfaktorite, nagu IFN-, TNF- ja IL-2 ülesreguleerimine ning aktivatsioonimarkerite ekspressioon. (CD25 ja CD69) ning tüvirakkude iseloomustamisega seotud tsütokiini (TCF1) ekspressioonitasemed tõusid; vastupidi, ammendumismarkerite, nagu PD-1 ja CTLA-4, ekspressioon vähenes ning lõplikult ammendunud T-rakkude osakaal vähenes.
TIM{0}} reguleeris sarnaselt negatiivselt kaasasündinud immuunsüsteemi loomulikke tapjarakke, dendriitrakke ja nende funktsioone. Eriti dendriitrakkudes on ka spetsiifiliselt kõrge TIM-4 ekspressioon. Uurimisrühm leidis, et ML-T7 mitte ainult ei suurenda looduslike tapjarakkude tapmisaktiivsust, vaid soodustab ka dendriitrakkude küpsemist ja suurendab nende antigeeniesitlemisvõimet, toimides TIM-ile-3 ja TIM-ile-4 .
Kasutades mitmesuguseid primaarseid hepatotsellulaarseid kartsinoomi hiiremudeleid, jälgisid nad ML-T7 terapeutilist toimet. Tulemused näitasid, et ravi ML-T7-ga annustes 20 mg/kg või 50 mg/kg, mida süstiti intraperitoneaalselt iga kahe päeva tagant, pärssis oluliselt kasvaja kasvu ja pikendas hiirte elulemusaega ning nõrgendas kasvaja mikrokeskkonna immunosupressiivset olemust. kontrollrühm.
Täiendavad uuringud näitasid, et 20 mg/kg ML-T7-ravi üksinda oli kasvajavastane toime sarnane 100 mg/kg PD-1-inhibiitoriga eraldiseisvale ravile ning nende kahe kombinatsiooni kasutamisel oli sünergistlik toime. , taasaktiveerides kasvaja mikrokeskkonnas CD8-positiivsed T-rakud ja looduslikud tapjarakud. 120 päeva pärast ravi kombinatsiooniga jäi 50% hiirtest ellu (3/6 hiirt), samas kui hiired, keda raviti ainult ML-T7 või PD-1 inhibiitoriga, jäid vaevu ellu (0/6 hiirt või 1/6 hiirt jäi ellu).
PD-1 inhibiitoritega kombineeritud ravi mõju
Lisaks võib ML-T7-ravi märkimisväärselt suurendada CAR-T-rakkude tsütotoksilisust kasvajarakkude vastu, indutseerides samal ajal CAR-T-rakkude apoptoosi ja suurenenud proliferatsiooni pärast ilmset metastaasi. Veelgi enam, ML-T7 ravi ületas tõhusalt CAR-T-rakuteraapia keerulise probleemi, st funktsionaalse ammendumise vältimise, parandades seeläbi CAR-T-rakkude efektiivsust, mille puhul 10 μM ML-T7 oli kõige tõhusam CAR-T-rakkude tagasipööramisel. ammendumine.
CAR-T rakkude suurendamiseks
Ohutuse osas oli ML-T7 hästi talutav ja ravi 50 mg/kg ML-T7 annusega, mida süstiti kõhukelmesse iga kahe päeva tagant, ei põhjustanud hiirtel olulisi kõrvaltoimeid.
Üldiselt näitas see uuring ML-T7, väikese molekuliga TIM-3 inhibiitori suurt potentsiaali kasutada kasvaja immunoteraapias. ML-T7 ei ole mitte ainult hea üksi võitlemisel, vaid võimeline tugevdama ka anti- CAR-T-rakuteraapia ja PD-1 inhibiitorravi kasvaja aktiivsus, mis on ohutu ja tõhus ning väärib kliinilise tõlke jaoks edasiarendamist.
